实验操作指导_技术中心_北京尊龙凯时科技有限公司

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实验操作指导

免疫亲和柱使用小贴士

2020-03-18

1）上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高； 2）上柱样品溶液中待测物含量勿超柱容量； 3）样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀，约每秒1-2滴； 4）抗原抗体发生反应的最佳温度是在25℃左右，实验需要的环境温度最好是室温24℃-28℃，太高或太低的温度都会对亲和柱的回收率有一定的影响。亲和柱在使用前如果在4-8℃环境下保存，也需要恢复至室温在进行实验； 5）亲和柱不要在无水状态下，琼脂容易干燥萎缩，影响亲和柱的质量； 6）亲和柱保质期为1.5年，储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温，因为缓冲液冻结，会严重影响亲和柱内的物理结构，对亲和柱的质量影响很大。 7）样品基质类型影响检测准确性。通常针对不同类型的样品产品说明书会有不同前处理方法。如：多次萃取，大量稀释提取液后再将稀释液上柱等。

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1）上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高； 2）上柱样品溶液中待测物含量勿超柱容量； 3）样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀，约每秒1-2滴； 4）抗原抗体发生反应的最佳温度是在25℃左右，实验需要的环境温度最好是室温24℃-28℃，太高或太低的温度都会对亲和柱的回收率有一定的影响。亲和柱在使用前如果在4-8℃环境下保存，也需要恢复至室温在进行实验； 5）亲和柱不要在无水状态下，琼脂容易干燥萎缩，影响亲和柱的质量； 6）亲和柱保质期为1.5年，储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温，因为缓冲液冻结，会严重影响亲和柱内的物理结构，对亲和柱的质量影响很大。 7）样品基质类型影响检测准确性。通常针对不同类型的样品产品说明书会有不同前处理方法。如：多次萃取，大量稀释提取液后再将稀释液上柱等。

试剂盒使用小贴士

2019-07-23

1)ELISA试剂盒中的试剂要与室温平衡后才能使用。通常提前回温1小时，试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。检测前注意标准溶液与样品溶液温度的一致性。 2)加液一般用微量移液器，按规定的量加入板孔中，注意加样时的一致性。 3)如果样品量比较大，加酶标记物、抗体、底物溶液和终止液时可用多道移液器，使加液过程迅速完成。 4)ELISA反应温度一般在18-30℃，24℃最佳。具体操作时可根据实际情况来控制。如温度低时，可放入恒温箱内孵育。如温度过高，则需降低温度或减短孵育时间。室温孵育时，ELISA板只要平置于操作台上即可。 5)洗板通常洗四次，次数太少可能洗不干净，太多会造成吸光度值偏低，在洗板的过程之中，第一次和最后一次最重要，第一次拍板要尽可能把没结合的物质洗掉，最后一次拍板要尽可能把多余的水拍干。 6)反应的温度和时间是影响显色的重要因素。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按说明书，力求准确。 7)酶标比色仪简称酶标仪，使用前先预热仪器15-30分钟，测读结果更稳定。 8)不同批次产品不能混用，否则会影响检测结果。确保使用的是试剂盒中原装的标准溶液。 9)样品吸光度值比最大标准溶液吸光度值更低时，样品需要加大稀释，并再次测定。 10）样品基质类型影响检测准确性。通常针对不同类型的样品试剂盒说明书会有不同前处理方法。如：发酵类样品待检液调PH至6-7方可点板检测，植物油脂类样品待检液需除脂后方可检测。

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1)ELISA试剂盒中的试剂要与室温平衡后才能使用。通常提前回温1小时，试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。检测前注意标准溶液与样品溶液温度的一致性。 2)加液一般用微量移液器，按规定的量加入板孔中，注意加样时的一致性。 3)如果样品量比较大，加酶标记物、抗体、底物溶液和终止液时可用多道移液器，使加液过程迅速完成。 4)ELISA反应温度一般在18-30℃，24℃最佳。具体操作时可根据实际情况来控制。如温度低时，可放入恒温箱内孵育。如温度过高，则需降低温度或减短孵育时间。室温孵育时，ELISA板只要平置于操作台上即可。 5)洗板通常洗四次，次数太少可能洗不干净，太多会造成吸光度值偏低，在洗板的过程之中，第一次和最后一次最重要，第一次拍板要尽可能把没结合的物质洗掉，最后一次拍板要尽可能把多余的水拍干。 6)反应的温度和时间是影响显色的重要因素。在定量测定中，加入底物后的反应温度和时间应按说明书，力求准确。 7)酶标比色仪简称酶标仪，使用前先预热仪器15-30分钟，测读结果更稳定。 8)不同批次产品不能混用，否则会影响检测结果。确保使用的是试剂盒中原装的标准溶液。 9)样品吸光度值比最大标准溶液吸光度值更低时，样品需要加大稀释，并再次测定。 10）样品基质类型影响检测准确性。通常针对不同类型的样品试剂盒说明书会有不同前处理方法。如：发酵类样品待检液调PH至6-7方可点板检测，植物油脂类样品待检液需除脂后方可检测。